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发酵白芥子穴位敷贴对支气管哮喘大鼠气道炎症和Th17/Treg免疫失衡的影响

Effect of acupoint application of fermented white mustard seed on airway inflammation and Th17/Treg immune imbalance in rats with bronchial asthma

摘要目的 探究发酵白芥子穴位敷贴对支气管哮喘大鼠气道炎症和辅助性T 细胞 17(Th17)/调节性 T 细胞(Treg)免疫失衡的影响.方法 将48 只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组、发酵组、非发酵组及假贴组,每组8 只.空白组用生理盐水代替干预,其余组大鼠均用卵清蛋白和氢氧化铝混合液致敏建立支气管哮喘模型.造模成功后,每天雾化激发 1h前,地塞米松组给予腹腔注射地塞米松1 mg/kg,1 次/d,共 10 次;发酵组、非发酵组将药物贴敷于大鼠大椎、膻中、肺俞(双侧)、脾俞(双侧)、肾俞(双侧)穴,每次 5h,1 次/d,共 10 次;假贴组用同样方法贴敷凡士林;空白组和模型组不做任何处理.于末次雾化激发时观察各组大鼠哮喘行为并计分;干预结束后,取肺组织行 HE 染色观察其病理形态,取大鼠血清和肺泡灌洗液,ELISA法检测Th17、Treg 相关细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-22(IL-22)、白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-35(IL-35)水平,Western blot法检测肺组织中IL-17、IL-22、IL-10、IL-35 蛋白表达情况.结果 与空白组比较,模型组、假贴组大鼠支气管黏膜上皮细胞受损脱落,管腔明显狭窄,气道壁不完整,肺泡内炎症细胞浸润明显,肺泡间隔明显增厚;哮喘行为学评分、血清及肺泡灌洗液中IL-17 和IL-22 水平、肺组织中IL-17 和IL-22 蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),血清及肺泡灌洗液中IL-10 和IL-35 水平、肺组织中IL-10 和IL-35 蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05).与模型组和假贴组比较,地塞米松组、发酵组、非发酵组大鼠支气管上皮较完整,偶见上皮细胞脱落,支气管黏膜偶见炎性细胞浸润,肺间质轻微增生;哮喘行为学评分、血清及肺泡灌洗液中IL-17 和IL-22 水平、肺组织中 IL-17 和IL-22 蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),血清及肺泡灌洗液中IL-10 和IL-35 水平、肺组织中IL-10 和IL-35蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05);地塞米松组、发酵组、非发酵组间肺组织病理形态、血清及肺泡灌洗液中各炎症指标水平和肺组织中蛋白表达量比较差异均无统计学意义(P 均>0.05).结论 发酵白芥子穴位敷贴能有效减轻支气管哮喘大鼠哮喘发作症状和气道炎症,降低体内炎性细胞因子水平,调节 Th17/Treg 免疫失衡状态.

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