摘要目的 探讨黄连温胆汤加减方对对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导的失眠大鼠的影响及其作用机制.方法 将50 只SD大鼠随机分为正常组、模型组、低剂量黄连温胆汤加减方组、中剂量黄连温胆汤加减方组、高剂量黄连温胆汤加减方组,每组10 只.除正常组外,其他组大鼠连续2d腹腔注射PCPA混悬液350 mg/kg建立失眠模型.从第3 天开始,低、中、高剂量黄连温胆汤加减方组分别给予0.845 g/100 g、1.69 g/100 g、3.38 g/100 g的黄连温胆汤加减方灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,持续灌胃14 d.对各组大鼠进行Morris水迷宫试验(记录中心区域的移动距离和潜伏时间)、戊巴比妥钠诱导睡眠试验(记录睡眠潜伏期、睡眠持续时间),蛋白印迹法检测各组大鼠海马组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-6(IL-6)、叉头框蛋白P3(FOXP3)表达情况,免疫荧光染色观察各组大鼠海马组织中CD80+/Iba1+和CD206+/Iba1+小胶质细胞表达情况;采用16S rDNA技术检测正常组、模型组、高剂量黄连温胆汤加减方组大鼠肠道菌群多样性及物种组成,进行生物信息学分析及代谢通路预测;采用GC-MS法测定正常组、模型组、高剂量黄连温胆汤加减方组大鼠粪便中各种短链脂肪酸含量;Pearson相关分析模型组大鼠粪便中短链脂肪酸与炎性细胞因子间的关系.结果 与正常组比较,模型组大鼠的中心区域移动距离和潜伏时间、睡眠潜伏期均明显延长(P均<0.05),睡眠持续时间明显缩短(P<0.05),海马组织中TNF-α、IL-6 蛋白相对表达量及CD80+/Iba1+表达荧光面积均明显升高(P均<0.05),海马组织中IL-10、FOXP3 蛋白相对表达量及CD206+/Iba1+表达荧光面积均明显降低(P均<0.05);肠道菌群丰富度明显下降,其中Simpson指数和Shannon指数均明显降低(P均<0.05),肠道菌群相关的代谢通路主要集中在脂质代谢,粪便中乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸、癸酸、异己酸含量均明显降低(P均<0.05).与模型组比较,高剂量黄连温胆汤加减方组大鼠的中心区域移动距离和潜伏时间、睡眠潜伏期均明显缩短(P均<0.05),睡眠持续时间明显延长(P<0.05),海马组织中TNF-α、IL-6 蛋白相对表达量及CD80+/Iba1+表达荧光面积均明显降低(P均<0.05),海马组织中IL-10、FOXP3 蛋白相对表达量及CD206+/Iba1+表达荧光面积均明显升高(P均<0.05);肠道菌群丰富度明显上升,Simpson指数、Shannon指数和粪便中乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸、癸酸、异己酸含量均明显升高(P均<0.05).Pearson相关分析显示模型组大鼠海马组织中TNF-α和IL-6 蛋白表达量与粪便中乙酸、丁酸、丙酸、异戊酸含量和短链脂肪酸总量呈负相关(P均<0.05),而IL-10、FOXP3 蛋白表达量与粪便中乙酸、丁酸、丙酸、异戊酸含量和短链脂肪酸总量呈正相关(P均<0.05).结论 黄连温胆汤加减方可增强PCPA诱导的失眠大鼠学习记忆能力、缩短睡眠潜伏期和延长睡眠时间,其可能通过维持肠道菌群稳态、促进短链脂肪酸产生、抑制神经炎症反应和小胶质细胞活化来缓解失眠.