摘要目的 探讨补肺颗粒对β2 受体激动剂耐受型支气管哮喘(哮喘)小鼠肺功能及3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)/蛋白激酶B(Akt)/磷酸二酯酶4D(PDE4D)信号通路的影响.方法 将64 只雌性BALB/C小鼠随机分为空白组、模型组、低沙美特罗组、高沙美特罗组、低补肺颗粒组、高补肺颗粒组、低沙美特罗+低补肺颗粒组、高沙美特罗+高补肺颗粒组,每组8 只.空白组不造模,其余组小鼠均采用卵清蛋白(OVA)、脂多糖(LPS)气道滴入致敏结合沙美特罗雾化吸入方法构建β2 受体激动剂耐受型哮喘模型.从激发第8 周开始,每次激发前30 min,模型组给予生理盐水灌胃;低沙美特罗组和高沙美特罗组给予生理盐水灌胃 2h后,分别雾化吸入 0.08 mg/kg、0.16 mg/kg的沙美特罗20 min;低补肺颗粒组和高补肺颗粒组分别给予10g生药/kg、40 g生药/kg补肺颗粒灌胃;低沙美特罗+低补肺颗粒组给予10g生药/kg补肺颗粒灌胃2h后,雾化吸入0.08 mg/kg沙美特罗20 min;高沙美特罗+高补肺颗粒组给予 40g生药/kg 补肺颗粒灌胃 2h后,雾化吸入0.16 mg/kg 沙美特罗 20 min.各组均连续干预 2 周后,采用动物肺功能分析仪检测小鼠肺功能[用力肺活量(FVC)、第0.1 秒用力肺活量(FEV0.1)、FEV0.1/FVC、呼气峰流速(PEF)、最大呼气流量峰值(MMEF)],苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠气管及肺组织病理形态,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠肺组织中PDK1、Akt、PDE4D、环磷酸腺苷(cAMP)mRNA表达情况.结果 模型组FVC、FEV0.1、FEV0.1/FVC、MMEF均明显低于空白组(P均<0.05);与模型组比较,高补肺颗粒组、高沙美特罗+高补肺颗粒组FVC均明显升高(P均<0.05),高沙美特罗组、低补肺颗粒组、低沙美特罗+低补肺颗粒组、高沙美特罗+高补肺颗粒组FEV0.1/FVC均明显升高(P均<0.05),低补肺颗粒组、高补肺颗粒组、高沙美特罗+高补肺颗粒组PEF均明显升高(P均<0.05),补肺颗粒各组FEV0.1、MMEF均明显升高(P均<0.05);低补肺颗粒组FEV0.1、FEV0.1/FVC、PEF、MMEF均明显高于低沙美特罗组、高沙美特罗组(P均<0.05);高补肺颗粒组FVC明显高于低沙美特罗组、高沙美特罗组(P均<0.05),FEV0.1 明显高于低沙美特罗组(P<0.05);高沙美特罗+高补肺颗粒组FVC明显高于高沙美特罗组(P<0.05),FEV0.1 明显高于低沙美特罗组(P<0.05).模型组小鼠气管管腔严重变形、狭窄,腔内可见大量的黏液分布及上皮细胞脱落,支气管管壁及基底膜层变厚,可见大量炎性细胞浸润;与模型组比较,各给药组小鼠气管形态轻微改变,仅有少量黏液及上皮细胞脱落,炎性浸润明显减少.与空白组比较,模型组小鼠肺组织中PDK1、Akt、PDE4D mRNA相对表达量均明显升高(P均<0.05),cAMP mRNA相对表达量明显降低(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠肺组织中PDK1、Akt、PDE4D mRNA相对表达量均明显降低(P均<0.05),cAMP mRNA相对表达量均明显升高(P均<0.05);低沙美特罗组、低沙美特罗+低补肺颗粒组PDK1 mRNA相对表达量均明显低于高沙美特罗组和高补肺颗粒组(P均<0.05),且低沙美特罗+低补肺颗粒组明显低于低沙美特罗组(P<0.05);低沙美特罗+低补肺颗粒组cAMP mRNA相对表达量明显高于高沙美特罗组、高补肺颗粒组及高沙美特罗+高补肺颗粒组(P均<0.05);各给药组间Akt、PDE4D mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P 均>0.05).结论 补肺颗粒单用及联合沙美特罗改善β2 受体激动剂耐受型哮喘小鼠肺功能的作用优于单纯沙美特罗,并且低剂量补肺颗粒联合低剂量沙美特罗可明显调控PDK1/Akt/PDE4D轴抑制cAMP分解,缓解支气管平滑肌收缩,减轻气道炎症,增强β2 受体对β2 受体激动剂的敏感性,说明补肺颗粒联合β2 受体激动剂可协同增效治疗哮喘.