萆薢分清颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾功能和Akt、TGF-β1、GSK3β表达的影响
Effects of Bixie Fenqing granules on expressions of Akt,TGF-β1 and GSK3βin renal fibrosis of rats with unilateral ureteral obstruction
摘要目的 观察萆薢分清颗粒对单侧输尿管梗阻大鼠肾纤维化相关蛋白蛋白激酶B(Akt)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、糖原合成酶激酶3 β(GSK3 β)表达的影响,探讨萆薢分清颗粒的肾脏保护作用.方法 取10只雄性SD大鼠作为正常组,另取50只雄性SD大鼠采用单侧输尿管梗阻的方法构建肾纤维化模型.将肾纤维化造模成功大鼠随机分为5组,每组10只.西药组给予2.62mL/(kg·d)的氯沙坦钾片溶液灌胃,中药高、中、低剂量组分别给予13.12 mL/(kg·d)、6.56 mL/(kg·d)、3.28mL/(kg·d)的萆薢分清颗粒溶液灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,均1次/d,连续灌胃4周.实验过程中观察大鼠的一般状态,末次灌胃结束后留取血清、尿液及肾组织标本,检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、尿微量白蛋白肌酐比值(ACR)、24 h尿蛋白定量(24h-UPQ),HE染色、Masson染色观察肾组织病理形态和胶原沉积情况,免疫组化法及West-ern blot法检测肾组织中Akt、TGF-β1、GSK3β蛋白表达情况.结果 与正常组比较,模型组大鼠精神萎靡,一般状态差,SCr、BUN水平和ACR、24h-UPQ均明显升高(P均<0.05);HE和Masson染色显示大鼠肾脏体积增大,结构紊乱,肾小球鲍曼囊囊腔增宽、小球萎缩,肾小管扩张,肾间质可见大量蓝色胶原纤维沉积,周围有空泡变性,组织结构较疏松;肾组织中Akt、TGF-β1、GSK3β蛋白表达平均光密度值和蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05).与模型组比较,各药物组大鼠情况均有不同程度改善,西药组、中药高剂量组改善最为明显;西药组、中药高剂量组SCr、BUN水平和ACR、24h-UPQ均明显降低(P均<0.05),HE和Masson染色显示肾脏病理变化均明显减轻,肾小球结构基本正常,仅见少量胶原纤维沉积,肾组织中Akt、TGF-β1、GSK3β蛋白表达平均光密度值和蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05).结论 萆薢分清颗粒可通过下调Akt、TGF-β1、GSK3β蛋白表达,保护单侧输尿管梗阻大鼠残存肾功能,减轻肾纤维化.
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