摘要目的 运用网络药理学结合动物实验探讨益消方治疗糖尿病认知障碍(DCI)的作用机制.方法 ①通过 TCMSP、HERB 数据库获取益消方有效成分及靶点集合,搜索GISGENET、OMIMM、GeneCards数据库得到DCI相关靶点.通过Cytoscape 3.9.0 软件建立"益消方成分-DCI靶点网络",对相关通路进行基因富集分析.②取8 只雄性C57BL/6J小鼠作为对照组,普通饲料喂养.取24 只雄性KKAy小鼠,高脂饲料喂养2 周建立DCI模型,将造模成功小鼠随机分为模型组、硫辛酸组、益消方组,每组8只.对照组与模型组给予纯水灌胃,硫辛酸组给予α-硫辛酸60 mg/(kg·d)灌胃,益消方组给予益消方7.7 g/(kg·d)灌胃,均1 次/d,连续灌胃12 周.测定小鼠体重、空腹血糖(FPG),Y迷宫评估认知功能(计算正确交替率),HE染色观察海马组织病理形态,试剂盒检测海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,RT-qPCR法和Western blot法检测海马组织中kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、核因子2 相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)mRNA及蛋白表达情况.结果 ①获得益消方有效成分137 个,有259 个靶点与DCI相关,氧化应激是参与DCI发生发展的重要因素.②与对照组比较,模型组小鼠体重及FPG均明显升高(P均<0.05),正确交替率明显降低(P<0.05);海马CA1 区神经元数量减少,见大量固缩坏死神经元;海马组织中SOD含量和Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA及蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),MDA含量和海马组织中Keap1 mRNA及蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05).与模型组比较,硫辛酸组小鼠FPG、益消方组小鼠体重与FPG均明显降低(P 均<0.05),硫辛酸组和益消方组正确交替率均明显升高(P均<0.05);益消方组和硫辛酸组海马CA1区神经元数量增加,坏死细胞较少;硫辛酸组和益消方组海马组织中SOD 含量和Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA及蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),MDA含量和Keap1 mRNA及蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05).结论 益消方可改善DCI小鼠认知功能,其机制可能与调节Nrf2/HO-1/NQO1 信号通路,抗氧化应激有关.