换一批
换一批盐穗木金属硫蛋白的原核表达及功能活性分析
Analysis of Prokaryotic Expression and Functional Activity of Halostachys Caspica Metallothionein
摘要为了探究盐穗木金属硫蛋白(HcMT)对金属离子的结合能力和转基因工程菌对非生物协迫的耐受性,将HcMT基因亚克隆至原核表达载体pET-32a上.诱导表达后,用5-Br-PAPS方法测定融合蛋白TrxA-HcMT与Zn2+离子的结合能力,并用原子吸收分光光度法测定其与多种金属离子的结合能力,用含有非生物协迫因素的培养基培养转基因工程菌,探究其对非生物协迫的耐受性.结果显示在诱导过程中添加Zn2+,融合蛋白TrxA-HcMT反应体系中吸光值与对照TrxA相比显著增高.TrxA-HcMT能够结合多种金属离子,其中对Cu2+的结合能力最强,是对照的20.3倍,对Cd2+的结合能力次之,是对照的5.6倍.在H2O2、NaHCO3、Na2CO3非生物协迫的条件下,转HcMT基因工程菌比对照组菌的耐受性更好.
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关键词
盐穗木金属硫蛋白金属结合能力原子吸收分光光度法非生物胁迫Halostachys caspica metallothioneinMetal-binding abilityAtomic Absorption Spectrometry (AAS)Abiotic stress
分类号
Q74
栏目名称
生命科学与技术
DOI
10.13568/j.cnki.651094.2017.04.016
发布时间
2017-12-07
基金项目
新疆维吾尔自治区青年科技创新人才培养工程项目
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