甲基硝基亚硝基胍对哈萨克族正常食管上皮细胞LRRFIP1、ALDH1L1基因甲基化及其表达的影响
Effects of MNNG on methylation and expression of LRRFIP1,ALDH1L1 on Kazakh normal esophageal epithelial cells
摘要目的:探讨 N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)对哈萨克族(哈族)正常食管上皮细胞 LRRFIP1、ALDH1L1基因甲基化及其表达的影响。方法将体外培养的哈族正常食管上皮细胞暴露于含0、0.75、1.5、3μg/mL MNNG 的培养基中24 h,分别为对照组、0.75μg/mL 组、1.50μg/mL 组、3.00μg/mL 组。用甲基化特异性聚合酶链(MSP)法检测 LRRFIP1、ALDH1L1基因甲基化状态,用 RT-PCR 和 Western Blot 法检测 LRRFIP1、ALDH1L1基因 mRNA 和蛋白表达。结果与对照组比较,各浓度组细胞 LRRFIP1基因甲基化状态没有改变;各组细胞 LRRFIP1基因 mRNA 表达水平分别为(1.021±0.237)、(2.828±0.350)、(1.453±0.179)、(1.952±0.223);与对照组比较,0.75μg/mL 组和3.00μg/mL 组表达均升高,差异均具有统计学意义(P <0.05);与对照组比较,1.50μg/mL 和3.00μg/mL 组 LRRFIP1蛋白表达水平均升高,分别为(4.233±0.048)、(4.519±0.033)、(5.377±0.057),差异有统计学意义(P <0.05);高浓度组细胞 ALDH1L1基因有从部分甲基化向完全甲基化转变的趋势,各组 ALDH1L1基因 mRNA 表达水平分别为(1.023±0.254)、(5.046±0.603)、(2.259±0.030)、(7.616±1.910),与对照组比较各浓度组均升高,差异均具有统计学意义(P <0.05);各组细胞 ALDH1L1蛋白表达水平分别为(0.725±0.014)、(0.913±0.033)、(1.142±0.010)、(1.334±0.047),与对照组比较各浓度组均升高,差异均具有统计学意义(P <0.05)。结论 MNNG 可促进哈族正常食管上皮细胞 ALDH1L1基因甲基化及 LRRFIP1、ALDH1L1表达的升高。
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