换一批非洲猪瘟病毒p54蛋白的高效表达及在ELISA中的应用
Studies on the Efficient Expression of African Swine Fever Virus p54 Protein and Its Antigenic Analysis in ELISA
摘要本研究旨在高效原核表达非洲猪瘟病毒(ASFV) p54蛋白,并进一步将其用于ELISA试验研究.参考非洲猪瘟病毒Con09/Bzz020株P54基因(E183L)的核苷酸序列,通过序列优化后合成P54基因,克隆至表达载体pET-30c(+),构建重组质粒pET-30c(+)-p54.结果显示,pET-30c(+)-p54有完整的阅读框架,可高效表达分子量约20.7 ku的p54蛋白,该蛋白表达稳定,具有可溶性,易于纯化,纯度高达900 μg·mL-1,所表达的p54蛋白的氨基酸序列与Con09/Bzz020株p54蛋白氨基酸序列相同;Western blot试验显示,表达的p54蛋白能与ASFV阳性血清发生特异性反应;ELISA试验显示,p54蛋白针对ASFV阳性血清和阴性血清的P/N值为4.67.研究结果证实p54蛋白表达产量高,易于纯化,具有较好的抗原性,可用于非洲猪瘟ELISA诊断.
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分类号
S852.659.1
栏目名称
DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2013.11.019
发布时间
2014-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
公益性行业科研专项（200903037）
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