换一批非编码小RNA(RyhB)调控禽致病性大肠杆菌毒力相关基因的分析
Analysis of the Regulation of Small Non-coding RNA (RyhB) on Avian Pathogenic Escherichia coli Virulence-related Genes
摘要以小RNA(RyhB)为研究对象,探索RyhB对禽致病性大肠杆菌相关毒力基因的调控研究.采用Red同源重组技术构建APEC野生株(AE17)RyhB的缺失株△RyhB以及构建出回复株△RyhB-comp.运用活菌计数法分别观察AE17、△RyhB、△RyhB-comp黏附鸡胚成纤维细胞DF-1的能力,并且利用Real-time PCR检测AE17、△RyhB和△RyhB-comp的8个毒力基因转录水平.结果成功构建出了基因缺失株△RyhB和回复株△RyhB-comp,△RyhB黏附细胞能力较AE 17均有显著地降低,约为AE17的62.5％,△RyhB-comp较△RyhB黏附能力显著上升,为△RyhB的1.4倍.同时,Real-time PCR结果显示,△RyhB的bcfA、yuA、tsh、luxS、fimC、ompA毒力基因的转录水平均极显著下降(P＜0.01),其mRNA转录水平分别约为AE17的19％、52％、20％、14％、28％、52％;△RyhB的iss、ibeA毒力基因表达水平分别上调约1.14倍和1.2倍.表明RyhB的缺失能够减弱APEC黏附DF-1的能力,并且使毒力基因的转录水平有所降低.根据以上结果,推测RyhB对APEC的毒力具有极其重要的调节作用.
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关键词
禽致病性大肠杆菌非编码小RNARed同源重组RyhB毒力基因avian pathogenic Escherichia colismall non-coding RNARed recombinationRyhBthe virulence genes
分类号
S852.612
栏目名称
DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2015.08.017
发布时间
2016-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（31372402）
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