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狂犬病病毒单质粒拯救系统的建立及应用

Generation of a Single Infectious RABV cDNA Clone by Inserting IRES Sequences

二维码有效期 120s

摘要旨在建立一种针对狂犬病病毒SAD L16株单质粒拯救的反向遗传操作系统.根据全长cDNA感染性克隆pSAD-L16 N、P和L基因上游序列的不同,分别设计多对引物将EMCV IRES序列、PV IRES序列和TaV 2A序列分别克隆入pSAD-L16载体的相应位置中,构建成5个重组狂犬病病毒全长cDNA克隆.在无需辅助质粒的情况下直接转染BSR T7/5细胞拯救病毒,并对拯救病毒进行生物学特性的鉴定和分析.结果表明,只有pSAD-NeNePeL和pSAD-NeNtPeL能够成功拯救出重组狂犬病病毒,获救病毒均高度致弱且增殖缓慢.获救的2株重组狂犬病病毒具有不同的遗传稳定性,表现出与野生型亲本毒株较大的差异.本研究首次建立起一种针对狂犬病病毒的单质粒拯救系统,为深入研究狂犬病病毒基因组结构与功能、分子致病机制以及狂犬病病毒与宿主相互作用等提供了一个基础的技术平台.

作者孙玉章 ^[1] 何彪 ^[2] 许运斌 ^[3] 丛彦龙 ^[4] Karl-Klaus Conzelmann ^[5] 学术成果认领

作者单位中国动物卫生与流行病学中心,青岛266032;慕尼黑大学基因中心,慕尼黑81377 ^[1] 军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122 ^[2] 浙江大学动物科学学院,杭州,310020 ^[3] 吉林大学动物医学学院,长春,130062 ^[4] 慕尼黑大学基因中心,慕尼黑81377 ^[5]

关键词狂犬病病毒单质粒拯救反向遗传学 rabies virus single infectious cDNA reverse genetics system

分类号 S852.659.5

栏目名称

预防兽医

DOI 10.11843/j.issn.0366-6964.2015.11.014

发布时间 2016-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）