换一批猪肌源性前体脂肪细胞的分离培养和成脂诱导分化研究
Isolation, Culture and Adipogenic Differention of Pig Myogenic Preadipocytes Cell
摘要本研究旨在建立猪肌源性前体脂肪细胞的体外培养体系,并探究成脂诱导分化过程中相关基因的表达,为进一步研究调控猪肌内脂肪沉积的分子机制提供试验材料.采集15日龄仔猪的背最长肌组织,使用Ⅱ型胶原酶进行消化,分离获得前体脂肪细胞,进行原代、传代培养以及成脂诱导,观察细胞形态、测定生长曲线、油红O染色鉴定以及检测成脂关键基因PPARγ、FABP4、C/EBPα、C/EBPβ、ZFP423、SREBP1、PRDM16和HSL在诱导分化过程中的表达量.结果表明,分离的猪肌源性前体脂肪细胞在6～7 h,发现少量细胞开始贴壁,贴壁的细胞呈似圆型、小梭型以及其它不规则形状,经传代后细胞形态均一,呈典型的成纤维细胞样,细胞的生长曲线呈S型.添加分化培养基进行诱导后,所有基因在细胞分化的早期均有表达,FABP4、C/EBPa、SR EBP1与PPARγ基因在分化早期表达量极显著升高(P＜0.01),在后期表达量极显著下降(P＜0.01),C/EBPβ、ZFP423和PRMD16基因的表达量在分化过程中未见显著变化,HSL的表达量随着分化进行极显著降低(P＜0.01).在诱导分化12 d左右,油红O染色呈现红色.综上表明,本研究成功建立了猪肌源性前体脂肪细胞的分离与培养体系,进行成脂诱导分化,揭示分化过程中关键基因的表达规律,为进一步研究猪肌内脂肪沉积的分子机制和改善肉质品质奠定基础.
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分类号
S828.2
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DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2018.12.010
发布时间
2019-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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