犬腺病毒2型E3基因自然缺失毒株的分离鉴定及其致病性
Isolation,Identification and Pathogenicity of Canine Adenovirus Type 2 Strain with Natural Deletion in E3 Gene
摘要犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)是重要的犬呼吸道病原,本试验旨在调查CAV-2在川渝部分地区的流行情况及其分离毒株致病性.采用检测CAV-2的特异性PCR方法,对2021-2022年采集自川渝部分地区的121份患呼吸道疾病的犬鼻咽拭子进行检测,分离流行毒株并研究其基因组特征及致病性.结果显示:CAV-2的阳性率为29.8%,值得注意的是,69.4%的阳性样本在E3基因存在9个核苷酸连续缺失(1 035-1 043 nt),导致4个氨基酸缺失(345-348 aa).成功分离出1株E3基因自然缺失毒株,噬斑纯化后的细胞半数感染值为10-9.46TCID50·0.1 mL-1;该毒株经口鼻感染幼犬后,幼犬出现体温升高、打喷嚏、流鼻涕及咳嗽等典型呼吸道症状.该分离毒株基因组全长31 786 bp,与GenBank中CAV-2基因组的核苷酸相似性为98.8%~98.9%.与已知的CAV-2基因组相比,本研究分离毒株除了 E3基因的独特突变外,还在Fiber、Hexon和E1A等蛋白有独特的氨基酸突变,使得该毒株在基因组进化树上区别于已知的CAV-2毒株.本试验首次获得了中国CAV-2毒株的基因组序列,发现了 E3基因的自然缺失现象,有助于了解CAV-2的流行及遗传进化.
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