过表达UCP3基因对萨湖羊前体脂肪细胞分化的影响

Effect of Overexpression of UCP3 Gene on the Differentiation of Sahu Sheep Preadipocytes

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摘要旨在阐明萨湖羊解偶联蛋白 3(UCP3)基因的组织、细胞表达模式,阐明过表达UCP3 对揭示对萨湖羊前体脂肪细胞分化的影响.本研究通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)技术检测UCP3 基因在 3 只萨湖羊心脏、肝脏、脾脏等组织中的表达分布及在成脂诱导分化不同时期的表达水平;过表达 UCP3 后,采用 qPCR验证过表达效率;利用油红 O 染色、脂质提取分析及脂肪细胞分化标志基因的检测,分别从细胞形态学和生物学角度明确过表达UCP3 对萨湖羊脂肪细胞脂质生成的影响.结果表明:UCP3 基因在萨湖羊各组织中广泛表达,在心脏和脾脏中相对表达量较高;时序表达谱显示,在萨湖羊前体脂肪细胞分化过程中UCP3 基因表达量呈上升的趋势(P<0.05);过表达UCP3 后,萨湖羊前体脂肪细胞的脂滴明显增多,极显著增加了脂质含量(P<0.01);脂肪细胞分化标志基因PPARγ、C/EBPα、LEP mRNA 水平极显著上升(P<0.01),FAS、UCP1 mRNA水平显著上升(P<0.05).本研究揭示了萨湖羊UCP3 的表达模式,验证了过表达UCP3 能够促进萨湖羊前体脂肪细胞的成脂分化,推测UCP3 是萨湖羊前体脂肪细胞的正调控因子,可能是通过调控 PPARγ、C/EBPα和FAS等分化关键基因的表达来实现的.