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基于小鼠模型研究肠道菌群紊乱对BVDV易感性的影响

Study on the Effect of Gut Microbiota Disturbance on Susceptibility to BVDV Based on a Mouse Model

摘要本试验通过建立肠道菌群紊乱小鼠模型,旨在探究肠道菌群紊乱对BVDV易感性的影响.肠道菌群紊乱小鼠模型建立试验,共分为 2 组,采用两性霉素 B、硫酸新霉素、氨苄西林、甲硝唑、盐酸万古霉素,以灌胃的方式构建肠道菌群紊乱小鼠模型,对照组给予等体积的生理盐水.连续处理 13 d后,无菌收集小鼠粪便,提取细菌 DNA,进行 16S rRNA测序,检测小鼠肠道菌群多样性和丰度的变化.肠道菌群紊乱对 BVDV 易感性的影响试验,共分为 2 组,抗生素处理组和未处理组小鼠均接种 105 TCID50 的CP型BVDV,于感染第 7 天,采集小鼠血液和十二指肠,通过 qRT-PCR、Western blot方法检测病毒载量.通过苏木精-伊红染色法(HE 染色)检测十二指肠病理组织变化.粪菌移植(FMT)移植试验共分为 2 组,以灌胃等体积生理盐水组为对照,进一步验证恢复肠道菌群对 BVDV感染的影响.结果显示,抗生素处理明显降低肠道菌群α多样性,维恩图分析也表明抗生素处理减少肠道菌群 OTU数量.β多样性结合柱形图分析进一步表明,抗生素处理组与未处理组小鼠肠道菌群的组成存在明显差异,其中厚壁菌门和拟杆菌门的相对丰度在抗生素处理组中均显著降低,然而变形菌门相对丰度明显增加.对BVDV易感性探究发现,菌群紊乱小鼠血液和十二指肠中BVDV载量均显著高于BVDV感染的菌群正常组小鼠的BVDV载量.West-ern blot和病理组织学检测也发现,肠道菌群紊乱增加了小鼠十二指肠中BVDV E0 蛋白表达水平,加重了十二指肠病理损伤.FMT回补给菌群紊乱小鼠后,BVDV载量显著降低,十二指肠病理变化也明显改善.综上,本研究成功建立肠道菌群紊乱小鼠模型,依据该模型进一步证实了肠道菌群紊乱可以增加 BVDV的易感性,而 FMT回补具有抑制BVDV感染的作用.这些结果可为防控BVDV感染的微生态制剂研发以及抗病毒药物的筛选奠定基础.

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畜牧兽医学报

畜牧兽医学报

2023年54卷8期

3466-3473页

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