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脂肪间充质干细胞与甲泼尼龙联合用药对小型猪异体皮肤移植的影响

Effect of Adipose Mesenchymal Stem Cells in Combination with Methylprednisolone on Allogeneic Skin Grafts in Minipigs

摘要旨在探究脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSCs)与甲泼尼龙(methylpred-nisolone,MP)联合用药对小型猪异体皮肤移植(allogeneic skin graft,ASG)所产生的免疫排斥反应与创口愈合的影响.对 12 头小型猪建立同种异体皮肤移植模型,根据术后对异体皮肤移植皮片不同的干预方式,将小型猪随机分为 4 组:异体皮肤移植组(ASG)、甲泼尼龙组(MP)、脂肪间充质干细胞组(ADSCs)、脂肪间充质干细胞与甲泼尼龙联合用药组(ADSCs+MP).术前与术后 7、14 d采集血液和组织样本,术后即刻及术后 7、14、21 d 拍照记录移植表皮临床变化情况.通过对移植皮片表观检查、病理组织学检测,血常规以及血清生化,移植皮片组织氧化应激、炎症、再生的指标检测,综合评价 4 组不同干预方式对小型猪异体皮肤移植所产生的免疫排斥反应与创口愈合方面的影响.从皮片表观与病理学分析可知,ASG组移植皮片存活时间在 7 d 左右、MP 组移植皮片存活时间在7~14 d、ADSCs组与 ADSCs+MP组存活时间为 14~21 d.并且在 7、14 d时 ADSCs+MP 组的 GSH、SOD的表达量显著升高,在免疫排斥方面,ADSCs+MP组的CD4+T细胞的数量,NF-κB的蛋白与基因表达量,IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6 促炎因子的表达量相对于 ASG组显著降低.在创口愈合方面,ADSCs+MP 组相对于 ASG组VEGF、TGF-β的蛋白表达,SDF-1、CXCR4 的表达显著上升.并且 ADSCs+MP 组相对于 ASG 组,PI3K、AKT、11β-HSD1 的蛋白与基因的表达量显著降低.综上所述:ADSCs+MP组相对于ASG组与MP组,可以延长移植皮片存活时间.并且 ADSCs+MP可以有效通过促进 GSH、SOD 的表达抑制氧化应激.在排异方面,ADSCs+MP可以通过抑制 NF-κB的表达抑制 IL-2、IFN-γ、IL-6、TNF-α等炎性因子的表达,从而抑制移植过后的免疫排斥反应.并且 ADSCs+MP可以通过促进 VEGF、TGF-β等愈合因子的表达促进创口愈合.进一步研究发现 ADSCs可能通过PI3K/AKT来影响 11β-HSD1 的表达,进而抑制皮肤皮质醇含量,并促进TGF-β、VEGF等生长因子的表达来促进创口肉芽组织再生与血管迁移.

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