换一批
换一批CYP19A1对兔卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响
Effects of CYP19A1 on Proliferation and Apoptosis of Rabbit Ovary Granulosa Cells
摘要旨在探究P450芳香化酶基因(cytochrome P450,family 19,subfamily A,polypeptide 1,CYP19A1)对兔卵巢颗粒细胞(granulosa cells,GCs)增殖和凋亡的影响.本研究选择健康状况良好的8月龄新西兰白兔母兔,采集卵巢组织,分离并鉴定GCs;利用一步克隆法获得兔CYP19A1基因全长序列,进行生物信息学分析;利用qRT-PCR、CCK8、FITC/PI等技术与方法,分析CYP19A1基因过表达和干扰对类固醇激素合成相关基因及GCs增殖和凋亡的影响.利用FSHR免疫荧光染色,鉴定分离的原代细胞是GCs,FSHR表达呈阳性.克隆CYP19A1基因,发现其cDNA全长为1 512 bp,编码503个氨基酸.经生物信息学预测发现,CYP19A1蛋白是一种稳定的亲水性蛋白,含有一个P450家族结构域,与其它物种同源性较高.在GCs中,CYP19A1基因表达量的改变显著或极显著影响了类固醇激素合成相关基因IGF1R、CYP1B1、CYP1A1、BMP6、CYP17A1的表达(P<0.05或P<0.01).过表达/干扰CYP19A1后,极显著上调/下调GCs增殖,极显著抑制/促进GCs凋亡水平(P<0.01).综上所述,CYP19A1可以促进GCs增殖,抑制GCs凋亡,调控类固醇激素合成相关基因的表达,进而参与母兔卵泡发育进程.
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