牛支原体能量耦合因子转运蛋白S组件MbBioY摄取外源生物素的功能分析
Functional Analysis of Biotin Uptake by the Energy-coupled Factor Transporter S Component MbBioY of Mycoplasma bovis
摘要牛支原体(M.bovis)感染与生存依赖于外界微环境提供的各类营养代谢因子.开展M.bovis外源生物素摄取的机制研究,将对M.bovis防控具有极其重要的意义.通过对M.bovis PG45 MbBioY(MBOVPG45_0349)基因进行系统发育分析、分子对接分析,筛选M.bovis PG45 MbBioY突变株,比较PG45和PG45ΔMbBioY的生物素敏感性,异源构建MbBioY功能性克隆验证其功能.结果表明,PG45染色体上存在一种崭新的生物素膜转运蛋白,全长996 bp,GC含量30.95%,蛋白长度为332个氨基酸,是由7个跨膜结构域组成的能量偶合因子(ECF)转运蛋白S成分MbBioY.进一步验证后发现,当M.bovis缺失MbBioY会影响其生长,表现出生物素代谢营养缺陷的表型.通过异源敲入生物素代谢营养缺陷大肠杆菌MG1655,表明MbBioY单独存在时,就能够恢复生物素代谢营养缺陷大肠杆菌缺失株的生理功能.初步证明,MbBioY编码的是能量偶合因子(ECF)转运蛋白的S成分具有摄取外源生物素的能力,该研究结果将补充细菌生物素代谢调控的多样性和复杂性,为M.bovis的有效防控提供独特视角.
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