换一批
换一批帕利亚姆病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用
Development and Application of Serotyping Real-time Quantitative RT-PCR Methods for Palyam Virus
摘要本研究拟建立帕利亚姆病毒(Palyam virus,PALV)血清型特异性实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法用于临床样本或媒介中PALV血清型鉴定.根据我国流行PALV毒株的基因节段2序列,设计扩增引物和Taq-Man探针,建立PALV血清型特异型qRT-PCR方法,对方法的特异性、灵敏性与重复性进行评估;以我国分离的28株PALV和90份核酸阳性血液样本评估检测方法的可靠性;利用建立的方法对采集库蠓样本中携带的PALV进行血清型鉴定.结果显示,建立的PALV血清型qRT-PCR检测方法具有良好的特异性与灵敏性,可检出核酸拷贝数下限在22至28 copies·μL.对28株PALV的qRT-PCR检测结果与病毒测序鉴定结果一致;对PALV不同感染阶段哨兵动物血液(90份)中的qRT-PCR鉴定结果与分离病毒的血清型鉴定结果一致;建立的方法可准确鉴定库蠓中携带PALV的血清型.本研究建立的PALV血清型qRT-PCR定型方法具有良好的特异强、敏感性与重复性,可用于PALV感染动物与媒介中PALV血清型的鉴定,具有良好的应用价值.
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关键词
帕利亚姆病毒血清型鉴定实时荧光定量RT-PCR检测方法Palyam virusserotype identificationreal-time quantitative reverse transcription polymerase chain reactiondetection method
分类号
S852.65
栏目名称
研究简报
DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2024.01.037
发布时间
2024-02-29
基金项目
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