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西藏那曲市牦牛源B型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及基因组分析

Isolation,Identification and Genome Analysis of Type B Pasteurella multocida Isolated from Yak in Tibetan Nakchu City

摘要旨在对引起西藏牦牛呼吸道感染的多杀性巴氏杆菌进行分离鉴定,明确病原菌的血清型、耐药性和致病性等生物学特性及基因组特征和遗传进化关系.本研究从西藏林芝、拉萨、那曲地区采集牦牛鼻咽拭子和组织病料498份,进行流行病学调查、细菌学分离纯化、生化试验、PCR鉴定、K-B药敏试验、动物致病性试验和分离株全基因组测序,并通过Mauve软件和MEGA 7软件进行基因共线性和系统进化分析.结果显示,经细菌分离纯化、生化试验及PCR鉴定,发现在西藏林芝、拉萨、那曲地区巴氏杆菌阳性率为2.61%,且从病死牦牛肺组织中分离出B型多杀性巴氏杆菌菌株,命名为"Pm XZ01"株;药敏试验发现Pm XZ01株对头孢菌素类、喹诺酮类、羧苄西林、丁胺卡那、复方新诺明和氯霉素类抗生素敏感;动物试验发现感染Pm XZ01株的家兔(1.2×108 CFU·mL-1)和小鼠(1×107 CFU·mL-1)死亡率高达100%,说明在该浓度下Pm XZ01株具有较强的致病性和致死性.全基因组测序获得Pm XZ01株全基因组大小为2 331 787 bp,GC含量为40.47%,重复序列总长度为3 266 bp;含有121个非编码RNA基因,包括59个tRNA基因,19个rRNA基因,43个ncRNA基因;2个假基因,5个基因岛,3个前噬菌体,68个碳水化合物活性酶基因;CARD注释分析发现1个PBP3抗性基因和2个EF-Tu抗性基因;VFDB和PHI-base注释分析发现101个毒力因子相关基因及663个表型突变基因等;共线性分析发现Pm XZ01株与猪源HB03 株(CP003328.1)、HN07 株(CP007040.1)和禽源 P1702 株(CP097616.1)共线性最好,而与牦牛源 Tibet-Pm1株(CP072655.1)共线性较差;系统进化树分析发现Pm XZ01株与中国广东牛源GDZQ201401株(KP083466.1)属于同一分支,进化关系最近.本研究完成了西藏牦牛巴氏杆菌病的流行病学调查,以及牦牛源B性多杀性巴氏杆菌的分离鉴定、生物学特性和全基因组测序分析,为探索西藏牦牛源B型多杀性巴氏杆菌病的流行规律和致病机制以及防控提供了参考.

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作者 刘博华 [1] 符汉宇 [1] 王玉恒 [2] 索朗斯珠 [1] 牛家强 [1] 包玉花 [2] 李家奎 [3] 徐业芬 [1] 学术成果认领
作者单位 西藏农牧学院动物科学学院西藏高原动物疫病研究自治区高校重点实验室,林芝 860000 [1] 西藏自治区兽医生物药品制造厂,拉萨 850000 [2] 西藏农牧学院动物科学学院西藏高原动物疫病研究自治区高校重点实验室,林芝 860000;华中农业大学动物医学院,武汉 430000 [3]
分类号 S852.612
栏目名称 预防兽医
DOI 10.11843/j.issn.0366-6964.2024.07.029
发布时间 2024-08-12
基金项目
西藏自治区科技厅重点项目 区域科技协同创新项目 西藏农牧学院研究生教育创新计划项目 现代农业产业技术体系
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