摘要旨在揭示鸡催乳素受体基因(PRLR)和精子鞭毛蛋白2基因(SPEF2)在鸡胚性腺的双向转录调控特征.采集4个胚龄(E12.5、E16.5、E18.5、E21.5)180只大午金凤鸡胚左右侧性腺,每3个样品混池组成1个重复,除E21.5母鸡右侧卵巢完全退化,其他同胚龄同性别同侧性腺共14分组,利用RT-qPCR检测PRLR和SPEF2的表达变化.利用cDNA末端快速扩增技术(5'RACE)和双荧光素酶报告基因系统(DLRA)分别鉴定PRLR和SPEF2的转录起始位点(TSS)及其核心启动子区,利用亚硫酸氢盐测序技术(BSP)检测启动子区甲基化水平.结果发现,PRLR在E12.5～E21.5睾丸中的表达显著高于卵巢(P＜0.05),而SPEF2在E18.5～E21.5卵巢中的表达显著高于睾丸(P＜0.05).PRLR的10个TSS中5个具有启动子活性,SPEF2的3个TSS全部具有启动子活性.PRLR的PA1启动子和SPEF2的SC启动子活性最高(P＜0.05),进一步检测发现二者的最高活性区域分别是长565 bp和478 bp的反向互补双向启动子区.478 bp的双向启动活性显著高于565 bp(P＜0.05),且二者对PRLR的启动活性均显著高于SPEF2(P＜0.05),这与E12.5～E21.5鸡胚性腺中PRLR的转录表达显著高于SPEF2(P＜0.05)一致.E21.5卵巢双向启动子区443 bp的CpG岛甲基化水平显著高于睾丸(P＜0.05),与睾丸PRLR表达显著高于卵巢一致;位于SPEF2第1内含子区159 bp的CpG岛甲基化水平睾丸显著高于卵巢(P＜0.05),与睾丸SPEF2的表达显著低于卵巢一致.综上,478 bp的双向核心启动子区调控鸡胚性腺中PRLR和SPEF2的转录表达,并且启动PRLR的转录活性高于SPEF2,PRLR的转录表达水平高于SPEF2;甲基化参与双向启动子调控性腺PRLR的转录表达,E21.5卵巢甲基化水平高,PRLR在卵巢表达低于睾丸.这些研究结果为揭示PRLR和SPEF2在鸡胚性腺发育中的转录调控机制研究提供理论依据.