换一批诱导型表达H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白的乳酸乳球菌的构建及其对鸭的免疫原性分析
Construction of Recombinant Lactococcus lactis Inducible Expressing HA Protein of H5N1 Subtype Avian Influenza Virus and Analysis of Its Immunogenicity in Ducks
摘要禽流感是由禽流感病毒引起的高度传染性疾病,受到感染的雏禽死亡率高,给家禽健康和经济带来严重影响.尽管传统疫苗可以有效预防禽流感,但由于鸭类养殖方式多为散户散养,环境多变,在接种传统疫苗时存在操作繁琐和免疫应激强等问题.为了解决此难题,本研究旨在开发一种便捷且安全的雏鸭血凝素(hemagglutinin,HA)口服生物制剂.我们通过构建系列锚定序列(pgsA、BmpA、cA和M6)-GFP报告表达系统,可视化地评估了不同类型锚定序列对乳酸菌乳球表面展示系统的效果,成功筛选出BmpA和cA作为乳酸菌乳球中的高效锚定序列.比较优化密码子前后的HA在乳酸乳球菌的表达效果后,选取优化密码子的HA基因序列与BmpA、cA连接,构建乳酸菌表达质粒.然后把构建好的表达质粒转入基因组整合HA1基因的乳酸乳球菌中,从而得到诱导型分泌联合表面展示HA蛋白的重组乳酸乳球菌(NZB-HA1-pNZ8148-BmpA-HA1和NZB-HA1-pNZ8148-HA1-cA).ELISA检测结果表明,与口服单一表达型的重组乳酸乳球菌相比,口服诱导型分泌-表面展示乳酸乳球菌能诱生雏鸭血清中更佳的HA特异性IgG水平.本研究成功构建了锚定序列-GFP乳酸菌筛选系统,利用其筛选出了适合乳酸乳球菌的高效锚定序列.并将HA蛋白通过分泌联合表面展示的方式在乳酸乳球菌进行复合表达,成功获得了对雏鸭具有良好HA免疫原性的口服生物制剂,为后续开发操作简便、安全的鸭禽流感口服疫苗提供可行的实践路径.
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DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2025.02.027
发布时间
2025-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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