换一批FST对猪卵巢颗粒细胞增殖凋亡及激素分泌的影响
Effect of FST on Proliferation,Apoptosis and Hormone Secretion of Porcine Ovarian Granulosa Cells
摘要旨在明确卵泡抑素(follistatin,FST)对猪卵巢颗粒细胞增殖、凋亡和激素分泌的影响,以期为探讨FST在猪卵泡生长过程中发挥的作用提供科学依据.本研究以永生化猪卵巢颗粒细胞为试验材料,将细胞分为过表达对照组、过表达组、干扰对照组和干扰组共4个试验组,每个试验组设置3个重复孔,根据FST基因的mRNA序列构建过表达质粒和设计siRNA,通过将其转染至颗粒细胞中,验证过表达及抑制效果.使用CCK-8和流式细胞法分析转染24、48和72 h后颗粒细胞增殖及凋亡情况,ELISA法检测细胞中雌二醇和孕酮含量变化,并进一步利用RT-PCR和WB法分别检测此过程中增殖、凋亡和激素合成相关基因的mRNA和蛋白表达水平.结果表明,构建的过表达质粒和siRNA可显著改变细胞中FST的表达水平(P＜0.01),且转染至猪卵巢颗粒细胞后,FST抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,并可显著降低细胞中增殖凋亡相关基因FSHR、GDF9、BCL2、CDKN1B的mRNA(P＜0.05)和蛋白表达水平(P＜0.01).而干扰FST后,卵巢颗粒细胞中雌二醇和孕酮的含量极显著增加(P＜0.01),且STAR、CYP11A1、CYP19A1、3β-HSD、17β-HSD等激素合成相关基因的mRNA和蛋白表达量同样极显著升高(P＜0.01).综上所述,在猪卵巢颗粒细胞中,FST基因表达水平的降低可有效促进细胞的增殖及雌二醇和孕酮的分泌,这一作用发挥可能与上调增殖凋亡相关基因和激素合成限速酶的表达有关.
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分类号
S828.3
栏目名称
DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2025.03.024
发布时间
2025-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
江西省农业科学院基础研究与人才培养项目（JXSNKYJCRC202217）
江西省农业科学院基础研究与人才培养项目（JXSNKYJCRC202411）
江西省自然科学基金项目（20202BAB205010）
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