换一批非洲猪瘟病毒p72蛋白抗体全自动化学发光酶免疫检测方法的建立
Establishment of a Fully Automated Chemiluminescent Enzyme Immunoassay for Detecting Antibodies against African Swine Fever Virus p72
摘要抗体检测对于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染诊断和疫苗研究至关重要,因此建立一种基于 ASFV p72蛋白抗体的全自动化学发光酶免疫分析方法(chemiluminescent enzyme immunoassay,CLEIA)具有重要意义.本研究以重组p72蛋白偶联的磁微粒(magnetic particles,MPs)捕获p72蛋白抗体,再结合碱性磷酸酶(alkaline phosphates,AP)标记的p72蛋白,借助全自动化学发光分析仪,分析猪血清中p72蛋白特异性抗体水平.经反应条件优化,建立了一种ASFV p72蛋白抗体全自动化学发光酶免疫检测方法.结果显示,建立的CLEIA阴性、阳性临界值为9.505 U·mL-1,诊断特异性和灵敏性分别为98.33％和100％,与其他猪病原阳性血清无交叉反应,批内和批间变异系数分别小于5％和10％,各种试剂组分可以保存6个月以上,对ASFV阳性标准血清,分析敏感性为1∶12 800,与国产商品化试剂盒的总符合率达95.90％.综上,本研究建立的化学发光方法具有高灵敏性和可重复性,有自动化检测、操作步骤简单的优势,可为ASFV的检测提供新的技术支持.
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关键词
非洲猪瘟病毒p72化学发光酶免疫抗体检测African swine fever virusp72chemiluminescent enzyme immunoassayantibody detection
分类号
S852.659.1
栏目名称
DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2025.03.034
发布时间
2025-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2021YFD2001205）
广东省基础与应用基础研究基金（2023A1515010234）
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