摘要旨在研究玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)对彭波半细毛羊睾丸支持细胞的生殖毒性及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对睾丸支持细胞抗氧化应激的保护机制.本试验选取体质健康3月龄雄性彭波半细毛羊((13.87±0.46)kg)的睾丸组织用以分离支持细胞进行体外染毒试验,试验组ZEA染毒剂量分别为25、50、100、200 μmol·L-1,对照组(NC组)仅添加0.1％DMSO,每组3个重复,筛选ZEA试验浓度.采用组合酶消化法、差速贴壁法和免疫荧光染色(IF)法进行彭波半细毛羊睾丸组织支持细胞分离、纯化培养及特异性抗体GATA4和Vimentin鉴定.CCK-8法、EdU法检测睾丸组织支持细胞活率及增殖能力.qRT-PCR和Western blot技术从转录和翻译水平检测细胞增殖(pcna)、凋亡(bax、caspase3、caspase9)和氧化应激(cat、gsh-px、sod1)等相关基因和蛋白的表达变化规律以及NAC的保护作用.结果发现,组合酶消化法和差速贴壁法能够获得满足ZEA染毒试验的SCs,随ZEA染毒浓度升高,SCs细胞活性和细胞增殖数量逐渐下降,200 μmol·L-1 ZEA处理组SCs活性和细胞增殖数量极显著低于NC组(P＜0.01);细胞增殖基因pcna的mRNA相对表达量和蛋白表达量均极显著低于NC组(P＜0.01);促凋亡相关基因bax、caspase3、caspase9的mRNA相对表达量极显著高于NC组(P＜0.01),CASPASE3蛋白表达量极显著高于NC组(P＜0.01),BAX、CASPASE9蛋白表达量显著高于NC组(P＜0.05);抗凋亡基因bcl-2的mRNA相对表达量和蛋白表达量显著低于NC组(P＜0.05);氧化应激相关基因gsh-px和sod1的mRNA相对表达量极显著高于NC组(P＜0.01),cat的mRNA相对表达量显著高于NC组(P＜0.05),CAT、SOD1蛋白表达量极显著于NC组(P＜0.01).N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后,与NC组对比,试验组cleaved-CASPASE-9、cleaved-CASPASE-3蛋白表达量极显著下降(P＜0.01),BAX蛋白表达量显著下降(P＜0.05),BCL-2蛋白表达量显著上升(P＜0.05).综上表明,ZEA暴露能够对彭波半细毛羊产生生殖毒性,抑制睾丸SCs增殖,促进SCs凋亡,导致SCs发生氧化损伤,而NAC对ZEA诱导的彭波半细毛羊睾丸SCs氧化损伤具有保护作用.