猪防御素-1的原核表达及抑菌效应分析
Prokaryotic Expression and Analysis of Bacteriostatic Effects of Porcine β-defensin-1
摘要旨在探究原核表达的猪防御素-1(porcine β-defensin-1)的体内外抑菌作用,为临床乳房炎的治疗提供材料和理论依据.本试验通过构建PBD-1的原核表达载体,优化诱导表达条件,过量表达纯化后测定最小抑菌浓度并绘制杀菌动力曲线.分别用E.coli 13-1和S.aureus 4-1构建小鼠乳房炎模型,并用不同浓度的PBD-1进行乳房内灌注治疗试验,通过乳腺组织病理变化及其载菌量观察治疗效果.结果显示,成功构建PBD-1的原核表达载体,重组PBD-1为可溶性表达,表达量为328.6 mg·mL-1.体外抑菌试验显示,PBD-1对E.coli 13-1、S.aureus 4-1和S.epidermidis 25-1均有抑制作用,且MIC为82.15μg·mL-1.乳房内灌注试验结果显示,1 × MIC和2× MIC的PBD-1对S.aureus 4-1和E.coli 13-1小鼠乳房炎模型有一定的治疗作用.重组PBD-1对3种细菌均具有体外抑制作用,且对S.aureus 4-1和E.coli 13-1的乳房炎模型具有治疗作用.
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