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单核细胞趋化蛋白诱导蛋白3对猪流行性腹泻病毒复制的体外抑制作用

Inhibitory Effect of Monocyte Chemotactic Protein Induction Protein 3 on Porcine Epidemic Diarrhea Virus Replication in vitro

摘要旨在探究单核细胞趋化蛋白诱导蛋白3(monocyte chemotactic protein-induced protein 3,MCPIP3)对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)复制的影响.通过RT-qPCR测定PEDV感染后ZC3H12C转录水平的动态变化;进而以猴肾上皮细胞cDNA为模板,PCR扩增出ZC3H12C基因,克隆到P3×Flag-CMV-14真核表达载体上,构建MCPIP3蛋白表达真核重组载体;分别于非洲绿猴胚胎肾细胞(MARC-145)上过表达或干扰MCPIP3蛋白,通过Western blot、荧光定量PCR、病毒滴度测定等方法探究其对PEDV复制的影响.结果表明,PEDV感染MARC-145细胞后显著上调ZC3H12C转录水平;成功构建MCPIP3重组质粒,其转染细胞后可诱导MCPIP3蛋白外源高表达,且特异性siRNA可显著下调ZC3H12C转录水平;与对照组相比,MCPIP3高表达后显著抑制PEDV N蛋白的表达水平,下调PEDV N基因的转录水平及细胞上清内病毒滴度,而干扰MCPIP3表达具有相反的效应,说明MCPIP3对PEDV在MARC-145细胞中的增殖具有显著抑制作用;同时,MCPIP3高表达显著下调PEDV感染诱导的IL-8、IL-12β及TNF-α的转录水平.本研究拓展了 MCPIP3蛋白的功能研究,为PEDV复制机制研究提供了理论基础.

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作者 周洪婷 [1] 孙心如 [1] 范宝超 [2] 张雪寒 [2] 周金柱 [2] 索朗斯珠 [3] 孙敏 [2] 贡嘎 [3] 李彬 [2] 学术成果认领
作者单位 西藏农牧学院动物科学学院,林芝 860019;江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室,南京 210014 [1] 江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室,南京 210014 [2] 西藏农牧学院动物科学学院,林芝 860019 [3]
分类号 S855.3
栏目名称
DOI 10.11843/j.issn.0366-6964.2025.06.028
发布时间 2025-07-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
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畜牧兽医学报

畜牧兽医学报

2025年56卷6期

2847-2856页

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