换一批用于非洲猪瘟病毒多靶标核酸检测的DNA假病毒制备及定量
Preparation and Quantification of DNA Pseudovirus with Multi-Target Nucleic Acid Detection for African Swine Fever Virus
摘要本研究旨在研制一种全程质控非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸检测、避免质粒交叉污染的DNA假病毒.将ASFV B646L/CD2v/MGF505-1R/MGF360-12L 4种检测关键基因及EGFP基因共构建于杆状病毒的转移载体pFastBac? Dual中,转化形成重组Bacmid pFastBac-EGFP-ASFV,转染至sf21细胞,包装产生ASFV重组杆状病毒.结果显示:通过荧光倒置显微镜观察,表达的EGFP蛋白绿色荧光信号指示成功获取AcMNPV-EGFP-ASFV病毒;重组杆状病毒基因组溯源分析,ASFV B646L/CD2v/MGF505-1R/MGF360-12L基因序列满足现行检测方法质控需求;ASFV质控品均匀、稳定,-20 ℃保存至少可稳定24个月.采用ddPCR定量为4.09× 103 copies·μL-本研究非洲猪瘟病毒DNA假病毒的制备,为非洲猪瘟疫情监测提供了新的技术支撑.
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分类号
S852.659.1
栏目名称
DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2025.07.047
发布时间
2025-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2022YFD1800605）
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