换一批基于免疫磁珠的智能手机辅助比色传感平台用于PDCoV/TGEV IgG抗体的快速检测
Rapid Visual Detection for PDCoV/TGEV IgG Antibodies Using Smartphone-Assisted Colorimetric Sensing Platform based on Immunomagnetic Beads
摘要本研究旨在建立灵敏、经济、便携和快速现场可视化检测猪丁型冠状病毒(PDCoV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)IgG抗体的方法.本研究分别将PDCoV和TGEV的N蛋白偶联到羧基磁珠表面形成"PDCoV-N/TGEV-N蛋白特异性IgG-酶标记抗体"三聚体复合物检测体系,建立基于免疫磁珠的间接ELISA方法,结合智能手机辅助比色传感平台,用于猪血清中PDCoV和TGEV IgG抗体的快速可视化检测.结果显示:以检测PDCoV IgG抗体为例,优化了免疫磁珠间接ELISA的反应条件,其最佳反应条件:磁珠用量25 μg、抗原包被浓度5 μg·mL-1(30 min)、封闭液为2.5％BSA+脱脂奶粉混合液(37 ℃封闭2 h)、血清孵育60 min、酶标二抗1∶8 000稀释(孵育30 min)、TMB显色10 min.在该最佳反应条件下,该方法对PDCoV和TGEV抗体检测效价分别达1∶32 768和1∶8 192,批内/批间变异系数均＜8％,且与7种常见猪源病原体阳性血清无交叉反应.临床验证显示,与中和试验相比,80份样本的检测总符合率达95％(PDCoV)和96.25％(TGEV).本研究建立的基于免疫磁珠的智能手机辅助比色传感平台的检测方法具有较高的特异性和敏感性,且重复性好,可用于PDCoV和TGEV临床血清样本的现场快速可视化检测,将为PDCoV/TGEV的流行病学调查和疫苗免疫效果评价提供可靠工具.
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关键词
免疫磁珠猪丁型冠状病毒猪传染性胃肠炎病毒N蛋白智能手机比色检测immunomagnetic beadsporcine deltacoronavirustransmissible gastroenteritis virusN proteinSmartphonecolorimetric detection
栏目名称
DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2025.09.034
发布时间
2025-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2024YFD1800405）
国家重点研发计划（2023YFD1801303）
国家自然科学基金（32302891）
河南省重点研发专项项目（231111113100）
河南省自然科学基金交叉学科创新研究群体项目（232300421001）
河南农业大学拔尖人才项目（30501279）
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