金黄色葡萄球菌噬菌体脂质体的制备及胞内抗菌活性
Preparation and Intracellular Antibacterial Activity of Liposomes Encapsulating Staphylococcus aureus Bacteriophage
摘要本试验旨在探讨脂质体作为载体,包封递送噬菌体入胞及噬菌体脂质体对牛乳腺上皮细胞内金黄色葡萄球菌的抗菌作用.本试验采用薄膜水合法制备脂质体,用于包封噬菌体SDQ制备噬菌体脂质体,并测定其酸碱稳定性和热稳定性.使用激光粒度仪测定噬菌体脂质体粒径大小、多分散系数和Zeta电位,结合透射电镜观察噬菌体脂质体结构特征.采用CCK-8法测定噬菌体脂质体对MAC-T细胞活力的影响.通过平板计数法测定噬菌体脂质体入胞效率和胞内杀菌活性.最终,选择大豆卵磷脂、胆固醇、吐温80、十八胺以8∶2∶1∶0.5比例制备脂质体,包封噬菌体SDQ后制备噬菌体脂质体(Lip-p-7).Lip-p-7包封率大于50%,在温度(4~60 ℃)和pH值(2~11)范围内活性稳定.Lip-p-7平均粒径为1 262.5 nm,Zeta电位从中性转向带负电荷,表明脂质体成功包封噬菌体SDQ;多分散系数(polydispersity index,PDI)小于0.7,表明其均匀分散.制备后的Lip-p-7储存于4 ℃条件下,可在90 d内保持完整活性,具有良好的稳定性.脂质体可有效提升噬菌体SDQ入胞数量,降低MAC-T细胞内金黄色葡萄球菌数量.综上,本试验为脂质体作为载体递送噬菌体入胞,为治疗胞内细菌感染提供参考.
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