新发肠致病性重组新型禽冠状病毒的分离和鉴定
Isolation and Identification of Novel Enteropathogenic Recombinant Avian Coronavirus
摘要2018年秋冬季以来,我国蛋鸡养殖地区新发了一种以开产蛋鸡产蛋下降和腹泻为主要特征的传染病,为查明该病的病因,作者进行了本试验.采集发病鸡肠道组织,在SPF鸡胚上连续盲传10代分离病原物;对分离毒株进行理化特性和血凝特性测定;利用设计的疑似病毒特异性引物,对提取的病毒核酸进行PCR检测、基因测序以及核苷酸同源性比对,根据比对结果设计引物获得病毒的全基因组核苷酸序列;以新型禽冠状病毒AvCoV/CH/SD/24株对SPF鸡、AA+白羽肉鸡和海兰蛋鸡进行攻毒,对发病SPF鸡肠道进行病理切片并用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定攻毒后不同鸡血清中传染性支气管炎病毒抗体滴度.结果显示:成功分离获得4株新型禽冠状病毒AvCoV/CH/BZ/24、AvCoV/CH/JS/24、AvCoV/CH/SD/24、AvCoV/CH/HB/24,病毒无血凝活性.核酸检测结果显示,有4份样品鸡传染性支气管炎病毒N和S1基因阳性,且N基因序列与数据库中鸡传染性支气管病毒相似性最高,S1基因序列与数据库中已有禽冠状病毒AvCoV/TZ/CA127/19株序列的相似性最高.全基因组扩增和测序结果显示,4株新型禽冠状病毒与2016年中国安徽省和2019年坦桑尼亚阿鲁沙发现并报道的两株禽冠状病毒全基因组核苷酸相似性高达97.1%~98.6%.系统发育分析表明,新型禽冠状病毒的S基因与类火鸡冠状病毒亲缘关系较近,处于同一进化分支的不同亚分支,而其它基因与GⅠ-19谱系传染性支气管炎病毒处于同一进化分支.动物实验表明,AvCoV/CH/SD/24株病毒能够引起SPF鸡腹泻,十二指肠绒毛脱落,绒毛顶端和黏膜固有层充血、出血,肾小管上皮细胞颗粒变性,间质充血,病毒主要通过泄殖腔排出体外,各脏器中以肠道和法氏囊的病毒载量最高,病毒不影响鸡的增重率;ELISA结果显示重组新型禽冠状病毒与鸡传染性支气管炎病毒具有血清学交叉反应;开产蛋鸡感染病毒后出现产蛋下降和腹泻,与临床发病一致.从蛋鸡产蛋下降和腹泻病例的肠道中分离获得的4株新型禽冠状病毒是类火鸡冠状病毒S基因与GⅠ-19谱系鸡传染性支气管炎病毒的重组病毒,能够引起鸡发生产蛋下降和腹泻.
更多相关知识
- 浏览1
- 被引0
- 下载0

相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文


换一批



