换一批传染性支气管炎病毒S1蛋白中和表位-Fc融合蛋白的表达及免疫原性鉴定
Expression and Immunogenicity Analysis of the Fusion Protein Composed of IBV S1 Protein Neutralizing Epitope and Avian IgY Fc Fragment
摘要为构建禽传染性支气管炎病毒(IBV)S1蛋白的免疫原,本研究通过比对已公布的S1中和表位和当前我国流行的GI-19型代表毒株ck/CH/LDL/091022(LDL091022)S1蛋白氨基酸序列,鉴定第22-100和410-492位氨基酸区域为中和表位优势区,分别命名为B1和B2.构建表达LDL091022 B1和B2的质粒以及在C端融合鸡IgY Fc片段的质粒,通过 Western blot和IFA检测发现融合IgY Fc片段后能够显著提高蛋白的表达量.转染Expi 293F细胞表达并纯化获得了融合IgY Fc片段的重组蛋白B1-Fc和B2-Fc.通过Western blot和ELISA鉴定B1-Fc和B2-Fc与LDL091022血清的反应性,结果发现B2-Fc与血清的反应性明显优于B1-Fc.将质粒pCAGGS-B2-Fc和重组蛋白B2-Fc免疫SPF鸡,通过ELISA和IFA检测血清中的抗体水平,结果显示B2-Fc加强免疫后能够有效诱导针对B2表位的抗体,且IFA结果显示血清能与LDL091022-S1蛋白和B2-Fc发生特异性反应.进一步利用中和试验检测血清中和效价为16.上述结果表明,本研究制备的IBV S1蛋白中和表位-Fc融合蛋白具有良好的表达水平和免疫原性,能够诱导机体产生一定水平的中和抗体,为进一步研发新型IBV亚单位疫苗提供了借鉴.
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关键词
禽传染性支气管炎病毒S1亚基中和表位IgY Fc片段免疫原性avian infectious bronchitis virusS1 subunitneutralizing epitopeIgY Fc fragmentimmunogenicity
分类号
S852.659.6
栏目名称
DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2025.11.033
发布时间
2026-01-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（U23A20236）
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