换一批猪伪狂犬病病毒gE蛋白单链抗体的制备及鉴定
Preparation and Identification of Single Chain Variable Fragment Antibodies against gE Protein of Pseudorabies Virus
摘要2011年以来,我国新流行的猪伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)变异毒株大大增加了该病毒抗体的检测工作量,阻断ELISA试剂盒的大量使用增加了对单克隆抗体的需求量,但杂交瘤细胞在传代过程中容易失去抗体分泌能力.本研究旨在基于单克隆抗体制备出具有良好结合活性、可在原核系统大量表达的单链抗体(scFV).本研究将原核表达的PRV gE蛋白免疫小鼠,经细胞融合及筛选得到稳定分泌针对PRV gE蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,以阳性杂交瘤细胞的cDNA为模板扩增得到抗体可变区序列,将重链和轻链可变区序列由Linker连接得到scFv基因,克隆到pET-28a质粒进行原核表达,对得到的重组抗体进行鉴定.结果显示:本研究获得了一株特异性针对PRV gE蛋白的单克隆抗体7B7,以7B7杂交瘤细胞的cDNA为模板,成功制备了能够特异性与PRV gE蛋白反应的单链抗体,并且能够通过原核表达系统进行表达.本研究为猪伪狂犬病病毒新型检测方法的开发提供了基础.
更多相关知识
分类号
S852.659.1
栏目名称
DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2026.01.027
发布时间
2026-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
- 浏览1
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
