山羊支原体山羊肺炎亚种膜表面蛋白P4的制备及免疫原性评价
Preparation and Immunogenicity Evaluation of Membrane Surface Protein P4 of Mycoplasma capricolum subsp.capricolumpneumonia
摘要旨在评估山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)膜表面蛋白P4的免疫原性和作为疫苗候选抗原的潜力.前期实验室筛选出Mccp的膜表面蛋白P4,本研究利用原核表达系统制备重组蛋白,纯化后与佐剂混合乳化制备疫苗,在山羊上进行免疫攻毒实验,通过临床症状、病理变化、血清抗体、肺脏载菌量、细胞因子等评价免疫效果.结果表明:成功表达纯化rP4蛋白,能够与His标签抗体、rP4多克隆抗体和Mccp感染抗体发生特异性反应;免疫动物能够刺激山羊产生高水平的抗体,但没有减轻临床症状,山羊存活率只有40%,与PBS对照组相同;病理学观察显示无论是急性还是慢性病例,P4组都要比PBS对照组更严重;肺脏载菌量高于全菌灭活组和PBS对照组;血清细胞因子结果显示P4组免疫后上调IL-2,下调IL-4水平.本研究成功表达纯化了rP4,制备疫苗免疫山羊能够诱导高水平抗体,但并不能保护山羊免受Mccp的攻毒,甚至会加重病变.研究结果为山羊传染性胸膜肺炎新型疫苗的设计研制提供了参考.
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