换一批利用InlB蛋白检测小鼠血清中产单核细胞李氏杆菌抗体的间接ELISA建立
Establishment of an Indirect ELISA for Detecting Antibodies against Listeria monocytogenes in Mouse Serum Using the InlB Protein
摘要旨在建立一种快速有效的检测产单核细胞李氏杆菌(LM)感染样品的间接ELISA方法.本研究采用原核表达系统体外诱导表达InlB蛋白,通过优化并确定间接ELISA方法的最佳参数,建立间接ELISA方法.本研究发现,利用pColdⅡ-10×His载体能够可溶性表达InlB蛋白;棋盘法优化后的条件为InlB蛋白包被浓度为4 μg·mL-1,10％脱脂奶粉室温封闭2 h,血清最适稀释倍数为1:400,37℃孵育1 h,酶标二抗最佳稀释度为1:2 500,37℃避光显色8 min,阴阳性临界值为0.37.本研究建立的间接ELISA方法仅与产单核细胞李氏杆菌阳性血清反应,当血清稀释度为1:800时检测仍为阳性;批内重复变异系数为2.79％～6.64％,批间重复的变异系数为2.61％～7.75％,重复性好;与商品化试剂盒相比,整体符合率为95.83％.本研究建立的LM感染样品的间接ELISA检测方法特异性强,敏感性高,可用于产单核细胞李氏杆菌感染样品的快速检测,为李斯特菌病的监测提供参考.
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栏目名称
DOI
10.11843/j.issn.0366-6964.2026.03.050
发布时间
2026-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2024YFD1800301）
中国农业科学院科技创新工程资助（CAAS-CSLPDCP-202403）
中国农业科学院科技创新工程资助（ASTIP-IAS-15）
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（Y2025YC47）
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