摘要禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)可随候鸟迁徙在全球范围传播,对动物与公共卫生安全构成潜在威胁.本研究于2022年监测江苏省迁徙水鸟AIV流行情况期间,从盐城湿地红嘴鸥粪便样本中分离获得两株H13亚型 AIV,分别命名为 A/Black-headed Gull/Jiangsu/F463/2022(H13N3)(简称 F463/H13N3)和 A/Black-headed Gull/Jiangsu/F481/2022(H13N6)(简称F481/H13N6).全基因组测序与遗传演化分析显示,两株病毒基因来源复杂,大部分基因片段源自鸥源H13和H16亚型AIV.其中,两株病毒的HA基因均与格鲁吉亚家鸡分离株相似性最高,F463/H13N3的NA基因来源于家鸭源H5N3亚型AIV,提示可能发生家禽至鸥的跨宿主重组事件.此外,两株分离株的NS基因与2023年瑞士赤狐感染的H5N1毒株内部基因关系密切,表明其可能参与H5亚型毒株的基因重配.分子特征分析显示,HA蛋白裂解位点氨基酸序列均为ISNR↓GLF,符合低致病性AIV分子特征,HA蛋白发生G228S突变,可能增强与人型受体结合的能力;PB2、PB1、M1及NS1蛋白均存在与哺乳动物适应性相关的突变位点.生物学特性分析表明,两株病毒均可在禽源及哺乳动物细胞中有效复制,但在小鼠体内复制能力有限,仅F463/H13N3于感染后第3天在鼻甲骨中检出低滴度病毒;两株病毒感染雏鸡后各组织脏器均未检出病毒,仅F463/H13N3感染的雏鸡血清中检测到低水平HI抗体.综上,本研究分离的鸥源H13亚型AIV存在跨越种间屏障感染哺乳动物的潜在风险,但尚未获得有效感染家禽的能力.本研究为我国首次报道江苏地区H13亚型AIV的分离与特性研究,对禽流感的溯源监测及防控策略具有重要参考价值.