猪流行性腹泻病毒广谱疫苗株的构建与免疫效果评价
Construction and Immunogenicity Evaluation of a Broad-Spectrum Vaccine Candidate Strain of Porcine Epidemic Diarrhea Virus
摘要本研究旨在探究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)G2b和G2c亚型在生物学特性、抗原性和交叉免疫原性方面的差异.通过多序列对比发现,G2c亚型毒株在S2亚基的关键功能域(包括HR1、HR2和胞质尾)累积大量稳定氨基酸突变.基于反向遗传系统,以G2b亚型毒株基因组为骨架,拯救了嵌合G2c亚型S2亚基的重组病毒rAH2012/12-S2QD,并在Vero细胞中评估重组病毒的复制动力学和遗传稳定性.随后,在小鼠模型中比较重组病毒和亲本病毒的免疫原性,并开展交叉中和试验.结果显示,重组病毒rAH2012/12-S2QD在Vero细胞中保持良好的增殖能力和遗传稳定性;且在体内诱导的血清抗体水平与亲本毒株相当,具有良好的免疫原性;交叉中和试验表明,G2b和G2c亚型毒株间存在明显的抗原漂移,其高免血清对异源毒株的中和活性均下降,而rAH2012/12-S2QD重组病毒诱导的高免血清对两种亚型毒株均展现较好的中和效果.综上,本研究发现PEDV G2c亚型毒株在S2亚基上存在多个关键氨基酸突变,明确了 S2亚基在调控病毒增殖和抗原性中的重要作用,进一步研究发现rAH2012/12-S2QD重组病毒能诱导广谱中和抗体.本研究揭示了 S2基因在诱导中和抗体产生中的关键作用,为PEDV新一代广谱疫苗的开发提供理论依据.
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