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副猪嗜血杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立

Rapid detection for Haemohilus parasuis by loop-mediated isothermal amplification

摘要采用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立了一种快速、灵敏、高度特异的副猪嗜血杆菌(Hps)检测方法.针对Hps 16S rRNA基因保守区域设计6条引物,在Bst大片段聚合酶的作用下,对模板DNA进行梯状等温扩增,并且优化LAMP的反应体系,检验其灵敏性与特异性.结果表明:该方法对Hps的最小检测限为0.2 pg/μL,灵敏性高于常规PCR方法103倍;完成反应仅需65 min.该方法灵敏度高、特异性好,能够作为Hps的快速诊断方法,对于基层和实验室应用均具有良好前景.

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