猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的原核表达和纯化
Prokaryotic expression and purification of granulocyte-macrophage colony stimulating factor
摘要粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)是一种具有多种生物学活性的细胞因子.本试验根据GenBank发表的猪的GM-CSF基因序列设计特异性引物,对GM-CSF基因片段进行扩增,扩增后的PCR产物经酶切后克隆入pET-28a载体.重组质粒转化入大肠杆菌杆菌BL21中经IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果证明,重组蛋白获得了成功表达,并且主要以包涵体的形式存在.Western blot结果证明重组蛋白具有良好免疫反应性.以上结果为进一步应用重组GM-CSF作为血液干细胞动员剂提供了基础.
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