产志贺毒素大肠杆菌志贺毒素Ⅰ型双抗体夹心ELISA检测方法的建立
Establishment of double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for detection of shiga toxin type Ⅰ in shiga toxin-producing Escherichia coli
摘要为建立双抗体夹心ELISA法检测产志贺毒素大肠杆菌(STEC)Ⅰ型志贺毒素(Stx1),利用重组Ⅰ型志贺毒素A亚单位(Stx1A)免疫小鼠,制备单克隆抗体,从中筛选出非竞争性的2株单抗,构建双抗体夹心法ELISA检测方法,并对试验样品中的志贺毒素进行检测.结果显示:共获得4株针对Stx1A的单克隆抗体,分别为1H2-G7、2H1-C12、8E7-E6和2F6-F8.当8E7-E6作为包被抗体,而2F6-F8作为检测抗体时,其检测毒素的OD值最高.对样品中的Stx进行检测,表明该方法只有效识别Stx1,对Stx2不识别.结论:成功建立了用于检测Stx1的双抗体夹心ELISA法,为临床上快速诊断STEC感染奠定了基础.
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