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产志贺毒素大肠杆菌志贺毒素Ⅰ型双抗体夹心ELISA检测方法的建立

Establishment of double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay for detection of shiga toxin type Ⅰ in shiga toxin-producing Escherichia coli

摘要为建立双抗体夹心ELISA法检测产志贺毒素大肠杆菌(STEC)Ⅰ型志贺毒素(Stx1),利用重组Ⅰ型志贺毒素A亚单位(Stx1A)免疫小鼠,制备单克隆抗体,从中筛选出非竞争性的2株单抗,构建双抗体夹心法ELISA检测方法,并对试验样品中的志贺毒素进行检测.结果显示:共获得4株针对Stx1A的单克隆抗体,分别为1H2-G7、2H1-C12、8E7-E6和2F6-F8.当8E7-E6作为包被抗体,而2F6-F8作为检测抗体时,其检测毒素的OD值最高.对样品中的Stx进行检测,表明该方法只有效识别Stx1,对Stx2不识别.结论:成功建立了用于检测Stx1的双抗体夹心ELISA法,为临床上快速诊断STEC感染奠定了基础.

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作者 宋路 [1] 曾晓燕 [2] 史凤娟 [2] 黄明明 [1] 宋小凯 [1] 李祥瑞 [1] 焦永军 [2] 学术成果认领
作者单位 南京农业大学动物医学院,江苏南京,210095 [1] 卫生部肠道病原微生物重点实验室江苏省疾病预防控制中心病原微生物研究所,江苏南京,210009 [2]
分类号 S852.6
栏目名称 试验研究
发布时间 2016-09-06
基金项目
江苏省六大人才高峰课题 江苏省自然科学基金
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