2019-2020年9株H9N2亚型禽流感病毒抗原性分析及候选疫苗株筛选

The antigenicity of 9 strains of H9N2 subtype avian influenza virus in 2019-2020 and screening of candidate vaccine strain

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摘要为了解近年来H9N2 亚型禽流感病毒的分子特征和抗原变异情况,本研究对选自 2019-2020 年的 9 株H9N2 亚型禽流感病毒的血凝素(HA)基因序列进行分析,进一步利用交叉血凝抑制试验和中和试验对抗原性进行分析,并以此筛选出候选疫苗株,开展免疫原性和攻毒保护试验研究.9 株病毒HA基因核苷酸同源性为91.2%～98.9%,表明这些毒株之间HA基因分化明显.9 株病毒HA蛋白裂解位点序列均为RSSR,符合低致病性禽流感病毒分子特征.所有9 株病毒HA均含有7 个潜在的糖基化位点.9 株病毒HA关键受体结合位点的234 位氨基酸由谷氨酰胺变为亮氨酸,提示这些毒株具有结合α2,6-Sialidase受体的能力.交叉血凝抑制试验显示各毒株之间出现最大 64 倍的抗原性差异,交叉中和试验显示各毒株之间出现最大1024 倍的抗原性差异.根据中和试验结果,利用AntigenMap制作抗原图谱,可以看出9 株病毒可以分为 2 个主要抗原群.筛选的Y2432 毒株制备灭活疫苗免疫鸡群后21 d,针对同源毒株平均血凝抑制(HI)抗体效价达到13.6 log2,使用同源毒株和异源毒株进行攻毒,保护率均为100%.Y2432 免疫SPF鸡,14 d即可产生高水平抗体,最高可达到14.4 log2,且抗体可维持140 d以上.筛选的候选疫苗株免疫原性和免疫保护效果较好,为预防H9N2 亚型禽流感的流行提供了重要技术储备.