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G418抗性基因nptⅡ双元载体的构建及谢瓦氏曲霉间型变种的遗传转化

Construction of G418 Resistance Gene Expression Cassette in Binary Vector and Genetic Transformation of Aspergillus chevalieri var.intermedius

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摘要为给谢瓦氏曲霉间型变种(Aspergillus chevalieri var.intermedius)多基因功能的研究提供新的选择标记,利用MYA培养基测G418敏感性后,以质粒pcDNA3.1(+)为中间载体构建nptⅡ基因表达元件,利用根癌农杆菌介导法转化至谢瓦氏曲霉间型变种.结果表明:用构巢曲霉PgpdA启动子、nptⅡ基因和构巢曲霉色氨酸C终止子TtrpC组成的G418抗性基因盒替换双元载体pDHt/sk-bar上的革丁膦抗性盒,成功构建双元载体pDHt/sknt,并且通过根癌农杆菌介导的转化获得的G418抗性转化子遗传稳定,nptⅡ基因主要以单拷贝形式插入谢瓦氏曲霉间型变种基因组DNA中.因此,双元载体pDHt/sknt适用于谢瓦氏曲霉间型变种的遗传转化.

作者曹旸 ^[1] 刘永翔 ^[2] 谭玉梅 ^[3] 王海 ^[1] 刘作易 ^[4] 学术成果认领

作者单位华中农业大学生命科学技术学院,湖北武汉,430070 ^[1] 贵州省农科院生物技术研究所,贵州贵阳550006;贵州省农业生物技术重点实验室,贵州贵阳550006 ^[2] 贵州省农业生物技术重点实验室,贵州贵阳,550006 ^[3] 华中农业大学生命科学技术学院,湖北武汉430070;贵州省农业生物技术重点实验室,贵州贵阳550006 ^[4]

关键词 G418抗性双元载体谢瓦氏曲霉间型变种遗传转化 G418 resistance Binary vector Aspergillus chevalieri var.intermedius Genetic transformation

分类号 Q933（微生物学遗传学）

栏目名称

园艺·食品加工

发布时间 2014-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

贵州省农科院专项