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miR-144-3p通过调控ABCG2信号通路对膀胱癌细胞的影响

Effects of Mir-144-3p on Bladder Cancer Cells by Regulating ABCG2 Sig-naling Pathway

摘要目的 探究miR-144-3p通过调控ATP结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)信号通路对膀胱癌细胞影响.方法 选取2023年5月黑龙江省医院泌尿科实验室1株人膀胱癌T24细胞株为研究对象,细胞培养后接种6孔板中,将其随机分为A组、B组、C组,每组细胞均设置3个平行样本,每个样本细胞检测均设置3个复孔(每组共计12个样本量).A组转染miR-144-3p模拟物,B组转染miR-144-3p抑制剂,C组转染无意义序列,另选正常膀胱上皮SV-HUC-1细胞株为D组,以实时定量联合酶链式反应(quantification real-time polymerase chian reaction,qRT-PCR)法检测4组细胞中miR-144-3p表达情况,以CCK-8法检测4组细胞增殖活力,以Transwell检测细胞迁移数量,检测ABCG2通路蛋白表达情况;以双荧光素酶报告基因实验预测miR-144-3p与ABCG2靶向结合关系.结果 转染前,T24细胞中miR-144-3p表达水平较SV-HUC-1 细胞低,ABCG2 水平较SV-HUC-1 细胞高,差异有统计学意义(t=8.145、13.928,P<0.05);转染 48 h时,miR-144-3p水平由低至高依次为B组、C组、A组,差异有统计学意义(P<0.05),ABCG2表达水平由低至高依次为A组、C组、B组,差异有统计学意义(P<0.05);转染48 h后,细胞增殖能力(A值)由低至高依次为A组、C组、B组,细胞凋亡率由低至高依次为B组、C组、A组,细胞迁移能力(个数)由低至高依次为A组、C组、B组,ABCG2表达水平由低至高依次为A组、C组、B组,差异有统计学意义(P<0.05);经在线数据库TargetScan预测,测得ABCG2 3'UTR与miR-144-3p存在结合靶点;共转染48 h时检测,3'-UTR-WT miR-144-3p组荧光素酶活性较 3'-UTR-Wut miR-144-3p组低,差异有统计学意义(P<0.05);3'-UTA-WT NC组、3'-UTR-Mut NC组荧光素酶活性相近,差异无统计学意义(P>0.05).结论 ABCG2 3'UTR与miR-144-3p存在结合靶点,miR-144-3p表达上调可抑制ABCG2表达,并抑制细胞迁移、增殖,促进细胞凋亡.

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分类号 R737
栏目名称 论著
DOI 10.19368/j.cnki.2096-1782.2023.20.005
发布时间 2024-01-15
基金项目
黑龙江省中医药科研项目
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