摘要目的 探讨雷公藤甲素(TPL)逆转人结直肠癌细胞对奥沙利铂(Oxa)耐药的作用及机制.方法 采用浓度梯度递增法构建结直肠癌耐药细胞系LoVo/Oxa.将传代培养的LoVo/Oxa细胞分为LoVo/Oxa组和LoVo/Oxa+TPL组,另取LoVo细胞作为LoVo组;LoVo组、LoVo/Oxa组细胞常规培养,LoVo/Oxa+TPL组细胞加入无毒剂量的TPL.采用细胞计数试剂盒-8检测3组细胞的耐药性.将传代培养的LoVo/Oxa细胞分为LoVo/Oxa组和LoVo/Oxa+TPL组,LoVo/Oxa组细胞常规培养,LoVo/Oxa+TPL组细胞加入无毒剂量的TPL.采用克隆形成实验检测2组细胞的增殖能力,流式细胞术检测2组细胞的细胞凋亡率和细胞周期,Transwell迁移侵袭实验检测2组细胞的迁移和侵袭能力,免疫印迹法检测2组细胞中周期及耐药相关蛋白[细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)、P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MDR1)]、凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2基因相关的X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、剪切型冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cl-caspase-3)]及迁移侵袭相关蛋白[波形蛋白(Vimentin)、上皮细胞钙黏附蛋白(E-cad)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9]的表达水平.结果 Oxa对LoVo/Oxa组细胞的半抑制浓度(IC50)显著高于LoVo组细胞(P<0.01),Oxa对LoVo/Oxa+TPL组细胞的IC50显著低于LoVo/Oxa组细胞(P<0.01).0、24 h时,LoVo/Oxa组和LoVo/Oxa+TPL组细胞的增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);48、72、96 h时,LoVo/Oxa+TPL组细胞的增殖能力显著低于LoVo/Oxa组(P<0.05).LoVo/Oxa+TPL组细胞克隆数显著多于LoVo/Oxa组(P<0.01).LoVo/Oxa+TPL组细胞中G1、G2期细胞占比显著低于LoVo/Oxa组(P<0.01),LoVo/Oxa+TPL组细胞中S期细胞占比显著高于LoVo/Oxa组(P<0.01).LoVo/Oxa+TPL组细胞的凋亡率显著高于LoVo/Oxa组(P<0.01).LoVo/Oxa+TPL组迁移细胞数和侵袭细胞数显著低于LoVo/Oxa组(P<0.01).LoVo/Oxa+TPL组细胞中Cyclin D1、Rb、MDR1、P-gp、Bcl-2、Vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白的相对表达量显著低于LoVo/Oxa组,Bax、Cl-caspase-3、E-cad蛋白的相对表达量显著高于LoVo/Oxa组(P<0.01);2组细胞中caspase-3蛋白的相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 TPL通过抑制细胞增殖和侵袭,以及促进细胞凋亡来逆转结直肠癌细胞对Oxa的耐药性.