换一批火球菌复制蛋白A的表达纯化和活性研究
Expression, Purification and Biochemical Characterization of Replication Protein A from Pyrococcus Furiosus
摘要 将火球菌（ Pyrococcus furiosus）的3个复制蛋白 A 相关基因 pfuRPA41（ PF2020）， pfuRPA32（PF2018），pfuRPA14（PF2019）克隆到 pDEST17质粒，并在 E．coli Rosetta （DE3）表达菌株中成功表达，最终通过固定化镍离子亲和层析分别得到纯度较高的三个复制蛋白 A 相关蛋白，对它们的单链 DNA 结合活性进行了详细测试．其中单独的 pfuRPA41能结合单链 DNA，而单独的 pfuRPA32以及 pfuRPA14不能结合单链 DNA；然而 pfuRPA32能够促进 pfuRPA41的单链 DNA 结合能力．同时单链 DNA 长度对 pfuRPA41结合单链 DNA 的能力有显著影响；在一定长度范围内，pfuRPA41结合单链 DNA 能力与单链 DNA 长度成正比．
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