换一批摘要目的 研究强心苷类药物地高辛和欧夹竹桃苷的抗病毒能力.方法 采用人肺泡腺癌基底上皮细胞(A549 细胞)和非洲绿猴肾细胞(vero细胞),利用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8 法)确定强心苷类药物地高辛和欧夹竹桃苷的细胞毒性,利用逆转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹法检测地高辛、欧夹竹桃苷对水疱性口炎病毒(VSV)和脑心肌炎病毒(EMCV)以及仙台病毒(SeV)和甲型流感病毒(H1N1)复制的影响.利用天然的IFN信号通路缺陷的vero细胞结合荧光显微技术、RT-qPCR、蛋白免疫印迹法分析地高辛、欧夹竹桃苷抗病毒的作用机制是否依赖IFN信号通路.在敲低钠钾腺苷三磷酸(ATP)酶α1 亚基(ATP1A1-shRNA)的vero细胞中,通过RT-qPCR、蛋白免疫印迹法等检测细胞内病毒复制及细胞的抗病毒IFN反应.结果 地高辛和欧夹竹桃苷可抑制VSV、H1N1、SeV和EMCV基因表达;结合使用IFN缺陷的vero细胞证明地高辛和欧夹竹桃苷发挥抗病毒作用不依赖于IFN信号通路;在敲低ATP1A1 的vero细胞中,地高辛和欧夹竹桃苷不再有明显的抗病毒作用.结论 地高辛、欧夹竹桃苷等强心苷类药物具有较广谱的抗病毒能力,主要通过抑制细胞膜内外钠/钾离子转运蛋白发挥抗病毒作用.
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