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山莨菪碱通过lncRNA LINC00657/miR-496通路对MPP+诱导SK-N-SH细胞损伤的保护作用研究

Protective Effect of Anisodamine on SK-N-SH Cell Injury Induced by MPP+ Through lncRNA LINC00657/miR-496 Pathway

摘要目的:探讨山莨菪碱(Ani)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导SK-N-SH细胞损伤的作用及分子机制.方法:将SK-N-SH细胞分为Con组,MPP+组,MPP+Ani-L、M、H组,MPP++si-NC组,MPP++si-LINC00657组,MPP++Ani+pcDNA组,MPP++Ani+pcDNA-LINC00657组.试剂盒检测丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽(GSH)活性;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测Bcl-2、Bax蛋白表达;实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测LINC00657和miR-496的表达;双荧光素酶报告实验检测LINC00657和miR-496的靶向关系.结果:不同浓度山莨菪碱处理后,MPP+诱导SK-N-SH细胞中MDA含量降低,GSH活性升高,细胞凋亡率降低,Bcl-2表达水平升高,Bax表达水平降低,LINC00657表达水平降低,miR-496表达水平升高,且呈浓度依赖性(P＜0.05).LINC00657靶向调控miR-496的表达;抑制LINC00657表达后,Mpp+诱导SK-N-SH细胞中MDA含量降低,GSH活性升高,细胞凋亡率降低,Bcl-2表达水平升高,Bax表达水平降低(P＜0.05).LINC00657过表达逆转了山莨菪碱对Mpp+诱导SK-N-SH细胞损伤的作用.结论:山莨菪碱通过调控lncRNA LINC00657/miR-496通路对MPP+诱导SK-N-SH细胞损伤起保护作用.