舒林酸提高γδT细胞杀伤胃癌细胞机制研究
Study on the mechanism of sulindac to enhance the cytotoxicityof γδT cells on gastric cancer cells
摘要目的 探讨舒林酸提高γδT细胞杀伤胃癌细胞的作用机制.方法 常规方法培养γδT细胞,收集培养第9天的γδT细胞用不同浓度的舒林酸(1、2、4、8、16、32 μmol/L)诱导24 h,收集培养上清液用于细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素12(IL-12)检测,沉淀细胞用于穿孔素、粒酶B、NKG2D流式细胞测定和用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测γδT细胞杀伤胃癌细胞株(SGC-7901和BCG-823)活性.每组测试样本和指标均设未加药物诱导的对照组.结果 舒林酸浓度在8 μmol /L时,γδT细胞穿孔素和粒酶B达最高[分别为(71.5±5.3)%和(78.3±7.1)%],明显高于对照组[分别为(51.4±7.3)%和(60.9±7.1)%].γδT细胞经不同浓度的舒林酸诱导后培养上清液中IL-12和TNF-α浓度没有差异;舒林酸在8 μmol/L时上清液中IFN-γ浓度达最高[(246.1±20.7)ng/L],明显高于对照组[(196.1±13.2)ng/L];当舒林酸浓度达32 μmol/L时,γδT细胞分泌的3种细胞因子明显低于对照组,两者比较有显著性差异(P<0.05).γδT细胞经舒林酸诱导后杀伤SGC-7901和BCG-823细胞活性在8 μmol/L时达到峰值,此时对SGC-7901和BCG-823的杀伤活性分别为 (73.6±3.9)%和(76.3±3.9)%,与对照组[(60.1±3.7)%和(59.2±4.5)%]比较有明显差异(P<0.05).结论 舒林酸诱导后γδT细胞杀伤SGC-7901和BCG-823活性明显增高的机制可能与γδT细胞表达穿孔素和粒酶B及分泌的IFN-γ有关.
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