二氮嗪后处理对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞保护作用的体外研究

The cardioprotective effects of diazoxide postconditioning against hypoxia/reoxygenation injury in cultured adult rat cardiac myocytes

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摘要目的研究线粒体ATP-敏感性钾通道(mitoKATP)开放剂二氮嗪(diazoxide,DZ)后处理对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞的影响.方法体外培养原代成年大鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型,随机分为5组:Normal组(在CO2培养箱中持续培养6h)；H/R组(缺氧3h复氧3h)；DZ组(缺氧3h复氧3h,在复氧5 min时给予100 mol/L DZ)；DZ +5-羟葵酸盐(5-hydroxydecanoate,5-HD)组(缺氧3h复氧3h,在缺氧末给予100 mol/L选择性mitoKATP通道阻断剂5-HD,然后在复氧5 min时给予100 mol/L DZ)；5-HD组(缺氧3h复氧3h,在缺氧末给予100 mol/L 5-HD).复氧3h末检测各组培养基中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量和丙二醛(MDA)含量,TUNEL法测定心肌细胞凋亡指数、测定心肌细胞收缩幅度.结果与Normal组相比,其他4组培养基中LDH漏出量和MDA含量明显升高,心肌细胞凋亡指数也显著增高,心肌细胞收缩幅度降低(P＜0.05)；与H/R组比较,DZ后处理使培养基中LDH漏出量及MDA含量减少、心肌细胞凋亡指数降低,复氧后心肌细胞收缩幅度明显增高(P＜0.05),但是缺氧末即刻给予5-HD可以逆转DZ的作用(P ＜0.05)；5-HD组与H/R组相比各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DZ后处理可以通过开放mitoKATP通道对缺氧复氧成年大鼠心肌细胞发挥保护作用.