换一批
换一批摘要目的：构建Lon蛋白酶编码基因缺失的大肠埃希菌（ E．coli MG1655）菌株。方法 PCR扩增基因序列，该序列两端与Lon蛋白酶基因部分序列同源，中间部分为氯霉素抗性基因。电转化法将该片段转入大肠埃希菌MG1655。利用宿主菌-大肠埃希菌MG1655内pKD46编码的λ重组系统，以PCR产物中的氯霉素抗性基因替代靶基因-Lon编码基因。氯霉素抗性平板筛选阳性重组体，琼脂糖凝胶电泳和DNA测序两种方法鉴定lon敲除突变株。结果氯霉素抗性平板成功筛选出重组菌株，基因检测结果表明Lon编码基因被氯霉素抗性基因替代。结论本研究通过该方法成功获得了E．coli MG1655蛋白酶编码基因lon敲除突变株，为探讨大肠埃希菌Lon在牙菌斑形成中的作用奠定了基础。
更多相关知识
分类号
R781.4
栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1000-2065.2014.07.018
发布时间
2014-09-04
基金项目
国家自然科学基金(31300029)
江苏省自然科学基金(BK20130213)
江苏省高校“青蓝工程”优秀青年骨干教师项目
徐州医学院优秀人才科研启动基金
- 浏览167
- 被引0
- 下载25
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
