Ⅱ型大麻素受体抑制剂对纳米级钛颗粒诱导 Ana -1细胞影响的实验研究
Effectso f the CB2 in hibitor AM630 on nanoscale titaniu m particles -induced Ana -1 cell s
摘要目的:观察Ⅱ型大麻素受体(CB2)选择性抑制剂 AM630对纳米级钛(Ti)颗粒诱导下 Ana -1细胞的影响。方法实验分5组,即空白组、颗粒组(Ti 0.5 g/L)、颗粒+AM63050 nmol/L(AM1)组、颗粒+AM630100 nmol/L(AM2)组、颗粒+AM630200 nmol/L(AM3)组。将 Ana -1细胞在不同浓度 AM630(50、100、200 nmol/L)中培养,采用 CCK -8法检测12、24、48 h 后细胞增殖活性,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF -α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量,采用蛋白质印迹法(Western Blotting)检测 TNF -α、IL -1β、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p -ERK)的表达水平。结果不同浓度的AM630在各时点对 Ana -1细胞增殖均无影响。颗粒组各时点 Ana-1细胞上清液中 TNF -α、IL -1β的含量与空白组相比明显升高,差异有统计学意义(P <0.01),并且随着时间的延长,炎症因子的含量递增;加入不同浓度AM630后,各时间点细胞上清液中 TNF -α、IL -1β的含量较颗粒组呈递减趋势,差异有统计学意义(P <0.05)。颗粒组 p -ERK 水平较空白组明显增加,而加入不同浓度 AM630后,p -ERK 水平逐渐降低,差异均具有统计学意义(P<0.05或 P <0.01)。结论CB2选择性抑制剂 AM630能通过抑制 ERK 磷酸化表达水平来降低纳米级钛颗粒诱导的 Ana -1细胞炎性因子的表达。
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